新葡萄8883官網(wǎng)AMG的細胞復蘇調(diào)整建議
細胞復蘇后狀態(tài)不佳的情況時有發(fā)生，為了確保細胞活性，以下是針對狀態(tài)不良的主要原因及解決方法。
1. 細胞凍存不當
如果發(fā)現(xiàn)細胞在凍存后的復蘇中狀態(tài)差，可以嘗試調(diào)整細胞狀態(tài)。增加血清的比例可能會有效，隨后再進行傳代調(diào)整，以促進細胞恢復活力。
2. 自行制備凍存細胞無活性
為確保凍存細胞的活性，應使用傳代次數(shù)少且對數(shù)期的細胞進行制備。同時，提高凍存的細胞密度有助于提升復蘇存活率，推薦的密度為每毫升100~300萬細胞。
3. 復蘇方法不當
在細胞復蘇過程中，講究“快融”原則。越快融化，細胞所受的損傷越小。在解凍時，應使用預熱的生長培養(yǎng)基以緩慢稀釋細胞，確保冷凍細胞迅速解凍。
4. 復蘇培養(yǎng)基使用不當
在使用培養(yǎng)基前確保其預熱，并應盡快移除含冷凍保護劑的培養(yǎng)基，以防止細胞活力下降。
5. 處理細胞時動作不夠輕柔
凍存和復蘇過程中對細胞的處理動作要輕柔，以免造成細胞損傷。切忌通過渦旋振蕩或用力敲打培養(yǎng)瓶的方式讓細胞脫落（培養(yǎng)昆蟲細胞時可例外），也不要高速離心細胞。
6. 細胞稀釋過度
為改善復蘇效果，建議將解凍后的細胞高密度接種。
7. 凍存液中保護劑未避光儲存
如果凍存保護劑在儲存過程中未避光，可能會轉(zhuǎn)變?yōu)閷毎卸拘晕镔|(zhì)。為確保細胞的安全性，建議更換為新取的凍存保護劑，并重新凍存細胞。
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