為什么我收到的是空管?本產(chǎn)品以凍干粉形式存在,微量不易觀察。使用前請瞬時離心,并加入適量溶劑進行溶解,以便使用。使用新葡萄8883官網(wǎng)AMG的鬼筆環(huán)肽染色細(xì)胞骨架時,可以使用甲醇來固定細(xì)胞嗎?由于甲醇會破壞Actin蛋白,因此不建議使用含有甲醇的固定液,推薦使用不含甲醇的甲醛作為替代。
在用新葡萄8883官網(wǎng)AMG的鬼筆環(huán)肽結(jié)合F-actin標(biāo)記石蠟切片的過程中,如果沒有觀察到信號,可能是因為細(xì)胞和組織經(jīng)過二甲苯或丙酮處理(例如在組織切片脫石蠟期間),這會阻礙鬼筆環(huán)肽與F-actin的結(jié)合。推薦使用通常不需要有機溶劑洗滌的冷凍切片代替石蠟切片,或者可以考慮使用抗肌動蛋白抗體。
探針的濃度應(yīng)該如何確定?請按照說明書中提供的稀釋比例進行使用,具體濃度信息尚不明確。當(dāng)使用新葡萄8883官網(wǎng)AMG的鬼筆環(huán)肽進行F-actin染色時,發(fā)現(xiàn)有的樣本染色成功,有的未染色,且信號較弱,該如何解決?可能的原因包括(1)染料濃度不足或孵育時間過短,建議提高染料濃度或延長培養(yǎng)時間;(2)檢查是否在錯誤的波長下分析細(xì)胞,建議再次確認(rèn)過濾器設(shè)置的正確性。
在無需透化步驟的情況下,鬼筆環(huán)肽是否可以直接染色固定后的細(xì)胞?熒光標(biāo)記的phalloidins僅適用于在固定透化后的組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)以及無細(xì)胞實驗中進行F-actin染色。如果染色后未觀察到熒光信號,可以考慮以下措施:(1)檢查儲液和工作液的制備是否存在問題;(2)固定和透化步驟非常重要,建議使用新鮮配置的4%多聚甲醛進行固定,并使用新鮮配置的0.5% Triton X-100進行透化;(3)嘗試優(yōu)化固定和透化的時間,以及染色工作液濃度和染色時間。
該產(chǎn)品是否適合流式細(xì)胞術(shù)? 新葡萄8883官網(wǎng)AMG的鬼筆環(huán)肽主要用于微絲的染色,通常使用熒光顯微鏡觀察結(jié)果,并不推薦用于流式檢測。是否可以用普通熒光顯微鏡進行觀察?普通熒光顯微鏡同樣可以進行檢測,不過激光共聚焦顯微鏡將提供更優(yōu)質(zhì)的拍照效果。
鬼筆環(huán)肽染料是否可以重復(fù)使用?通常情況下,染色液在使用后可能會影響后續(xù)的染色效果,因此建議勿重復(fù)使用。此外,新葡萄8883官網(wǎng)AMG的鬼筆環(huán)肽按照說明書添加,濃度較低,這也是染料不能重復(fù)利用的原因。