新葡萄8883官網AMG提供了一種高效的3T3-L1脂肪細胞誘導分化方案，能夠為研究脂肪細胞分化、代謝及相關代謝性疾病（如肥胖和糖尿病）的機制提供強有力的支持。3T3-L1細胞系最早于1974年由Green和Kehinde等人從小鼠胚胎成纖維細胞分離而成，因其能在體外有效分化為脂肪樣細胞，因此被廣泛應用于相關科學研究。
誘導分化的效果可以通過多種方法檢測，其中油紅O染色法是一種經典且直觀的方式。油紅O是一種脂溶性染料，專門用于與細胞內的中性脂質結合，并形成紅色脂滴。在顯微鏡下觀察脂滴數量和大小的增加可以表明誘導分化的成功。此外，通過檢測脂肪細胞特異性基因（如PPARγ、aP2及LPL）的表達水平，也可評估細胞的分化程度，常用的技術包括Western Blot。
實驗方案概述
第一階段：細胞培養
1. 將細胞以每平方厘米3×103的密度接種于六孔板中，注意均勻鋪板，以確保分化效果。這一過程建議使用早代次的細胞，避免不均勻分化和細胞漂浮。
2. 用DMEM高糖培養基培養細胞，加入10%小牛血清或胎牛血清，待細胞匯合度達到約70%時更換培養基，并在37℃，5% CO2的培養箱中繼續培養至約90%的匯合度。切記，分化前匯合度不應超過70%，以減少細胞死亡的風險。
第二階段：分化誘導培養基配制
1. 在無菌條件下，配置MDI誘導分化培養基和胰島素培養基。此步驟需在培養箱內進行，確保所有操作均符合無菌要求。
2. 配置100 mL的MDI誘導分化培養基時，需要新鮮制備IBMX（50 mM）和地塞米松（1 mM）的儲備溶液。胰島素需根據制造商說明復溶，并加入DMEM中直到最終濃度達到10 μg/mL。
第三階段：3T3-L1細胞向脂肪樣細胞的分化
1. 從培養箱中取出細胞培養板，去除DMEM培養基，并在每孔加入2-3 mL的MDI誘導培養基，標記為第0天。加入誘導劑時，手法要輕柔，以避免沖擊導致細胞漂浮。
2. 在第3天，去除MDI誘導培養基，并加入2-3 mL的胰島素培養基替換；第6天更換為新鮮的DMEM培養基。一般在第7-10天可獲得完全分化的脂肪樣細胞。
3. 分化效果的檢測可以通過油紅O染色進行，以監測脂質的累積，或檢測脂肪細胞特異性標志物（如脂聯素和FABP4）的表達，進一步評估分化效果。
通過新葡萄8883官網AMG的方案，研究人員可以準確高效地研究脂肪細胞的分化過程，為未來的相關疾病研究奠定堅實的基礎。
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